点击这里给我发消息
点击这里给我发消息
点击这里给我发消息

酶或生化试剂 请选择:

酶类

PCR,RT-PCR相关酶 修饰酶 限制性内切酶   常用生化试剂

PCR,RT-PCR相关酶

Taq DNA聚合酶

M-MLV Transcriptase( 反转录酶 )

Pfu DNA聚合酶 

AMV Transcriptase(反转录酶)

金牌DNA聚合酶(热启动酶)

Rnasin(RNA酶抑制剂 )

TthDNA聚合酶

UNG酶(尿嘧啶DNA糖基化酶) 

dNTP 

常用的生化酶稳定剂价格表

Taq酶抗体(单克隆)  

pGEM T载体

编号

规格

售价¥

ZT00201

20次

400

ZT00202

100次

1700

pGEM-T载体

DH5α感受态细胞(仅供应上海地区)

编号

规格

售价¥

ZT00203-1

10×100ul

200
ZT00203-2
20×100ul
300

感受态细胞


高温聚合酶简介

随着分子生物学研究发展的不断广泛和深入, PCR 已成为一门相当成熟的常规技术,而热聚合酶(即 Taq 酶)的合理选择是 PCR 成败与否的一个关键因素,目前市面上有多种 Taq 酶,能够满足多方面的实验需要,那么,如何选择最合适自己实验的 Taq 酶呢?根据用户经常考虑的指标,如特异性、保真性、耐热性、扩增速率、扩增片段长度、能否进行复杂模板扩增以及优化条件难易等等,我们在这儿将主要的几种 Taq 酶进行简单的归类比较。

高保真Taq酶
  保真性的一个通用标准是错配率,错配率越低保真性越好。普通 Taq 酶的错配率在 10 -5 碱基 / 循环数,而高保真 Taq 酶错配率可降到 10 -6 数量级,大大降低了出错的可能性;它适合对 PCR 保真性要求较高的实验,如基因筛选、测序、突变检测等等。高保真 Taq 酶的保真原理是:高保真 Taq 酶具有 3' 到 5' 核酸外切酶( Proofreading )的活性, PCR 扩增途中如果产生了错配的碱基,它可以将其切掉,从而保证了扩增的准确性;需要提醒用户的是由于此酶具有核酸外切酶功能,往往扩增效率低一些,有的还会降解引物,而且产物一般不宜用 TA 或 UA 克隆法克隆。目前市面上主要有两类产品:一类是混合型的高保真酶,将带有 Proofreading 活性的酶与普通 Taq 酶(用于提高扩增效率)混合起来;另一类是单一型的高保真酶。

热启动Taq酶(高特异Taq酶)

影响 PCR 特异性的因素很多,包括模板、引物性质及质量、反应条件的控制等等,而高特异性 Taq 酶的出现大大减少了摸条件这一繁琐的实验过程,也为 PCR 产物快速有效的纯化( PCR 产物直接纯化)打下了基础;这类酶最典型的代表是热启动 Taq 酶。大家都知道,在 PCR 第一个循环变性之前,有一个升温的过程,引物和模板会有一些非特异性配对,如果这时 Taq 酶发挥活性,就很容易产生非特异性扩增,由于循环初期模板量非常少,产生的非特异性条带经过后面的指数扩增,就会严重干扰目的片段的扩增,甚至导致特异性条带不能扩出;而热启动 Taq 酶是必需经过高温才能激活的酶,因此在初始循环的变性之前它没有活性,不会产生非特异性扩增,这就大大提高了 PCR 扩增的特异性。第一代热启动 Taq 酶往往直接在 Taq 酶上做一些辅助修饰,比如用 Taq 酶抗体抑制剂、固体石蜡封闭等,但抗体、固体石蜡等异物的掺入,会对实验造成一定的负面影响;新一代的热启动 Taq 酶是通过内部改造的基因重组酶,它真正实现便利的热启动,无需别的辅助抑制物,也不用担心抑制剂不稳定,使用起来十分方便、高效,是临床 PCR 诊断试剂的理想选择。 此外,热启动的 Taq 酶也是实现一步法 RT-PCR 的基础,在 RT 反应较低温度下, Taq 酶没有活性,逆转录酶发挥活性; RT 反应结束,高温灭活逆转录酶的同时,激活 Taq 酶,进行 PCR 反应。

高耐热Taq酶
    对于有些模板变性温度较高,需要时间较长,可能要求高耐热性 Taq 酶,如 NEB 公司的 Vent 和 Deep Vent DNA 聚合酶系列,两者都是从海底火山口分离出来后克隆的,是普通 Taq 酶耐热性的三倍以上,前者在 95°C 半衰期近 7 小时, 100°C 近 2 小时;而后者分别为 23 小时和 8 小时。
超长片段扩增Taq酶
   对于作基因组图谱、测序及分子遗传学研究的用户,可能会用到超长片段的扩增, Clontech 公司的 Advantage Genomic 系列混有 Tth DNA 聚合酶, Proofreading 酶和热启动抗体,对复杂模板可扩增 10kb 片段,简单模板可达 40kb 。
关于复杂模板的扩增
   对于模板结构复杂,如 GC 含量高( >60% ),有二级结构等,普通的 Taq 酶可能难以延伸下去,加入 DMSO 等助熔剂可帮助扩增顺利进行,但 DMSO 有毒,而且用量需要优化。 QIAGEN 公司的任何一种 Taq 酶都附有特制的 Q- 溶液,操作方便、安全,对复杂模板的扩增特别有效。


PowerQ®qTaq DNA聚合酶

编号

规格

售价¥

ZP00101

200U

60

ZP00102

1000U

250

ZP00103

5000U

1000
 
相关试剂
抽提试剂盒...
反转录试剂盒...
dNTPs...
荧光定量试剂盒...
枪头、离心管...

         
用途

Taq酶主要用于对保真性要求不高的PCR扩增和荧光定量PCR,为方便用户对镁离子浓度的调整,所有的buffer都是不含镁离子的,镁离子单独包装。

Taq酶特征

•  克隆有 Thermu aquaticus DNA Polymerase 基因的大肠杆菌经诱导表达后,再经三次过柱纯化分离出来的一个约 94 KD 的重组蛋白。

•  具有 5' 到 3‘合成 DNA 的能力;无3 '到 5‘外切酶的活性。

•  具有 5 ' 到 3 ‘外切酶的活性, 特别适合用于荧光定量PCR

•  具有 3‘端加 A 的功能,产物经纯化后可直接用于T-A克隆。

•  无外源核酸酶和细菌 DNA 污染。

•  SDS - PAGE 检测,纯度> 95% 。

•  最佳延伸温度 72 ℃ ,最佳 Mg 2+ 浓度 1.5mM ,最佳 dNTPS 浓度 0.2mM , 延伸速度为 2000base/min 。

•  10 × PCR buffer: 500mM KCl, 100mM Tris-HCl (pH 9.0 , 25℃ ), 1% TritonX-100 和 15mM MgCl2 。

•  Storage buffer: 20mM Tris-HCl (pH 8.0), 100mM KCl, 0.1mM EDTA, 1mM DTT, 50%甘油, 0.5% Nonidet -P40 和 0.5% Tween20 。

Taq酶单位定义

在 74℃ 条件下, 30 分钟内催化 10nmol dNTP 的掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量为一个单位。反应条件为: 50mM Tris-HCl (pH 9.0 , 25℃ ), 50mM NaCl, 5mM MgCl2, 200mM dNTP( 含未标记和标记 [3H] dTTP ), 10mg 活化的小牛胸腺 DNA 和 0.1mg/ml BSA, 终反应体积为 50ml 。

Taq酶(大宗用户价格面议,电话:021-54460831)


分享到:



欢迎订阅电子期刊
订阅我们的Newsletter,及时阅览最有价值的行业资讯信息和技术资料!


2XTaq PCR MasterMix

编号

规格

售价¥

ZP00101-01

100 rcs (2x1.25ml)

200

ZP00102-02

2 x 100 rcs (4x1.25ml)

350
 
相关试剂
抽提试剂盒...
反转录试剂盒...
dNTPs...
荧光定量试剂盒...
枪头、离心管...

2xTaq PCR MasterMix


Taq酶抗体(单克隆)

Size:100ul,for 500 units of Taq polymerase
Price:¥300.00
Taq酶抗体(单克隆)说明书
主要用于热启动Taq酶的制备、热启动PCR实验,可以增强荧光PCR的灵敏度和特异性。


Pfu DNA聚合酶(高保真酶)

编号

规格

售价¥

ZP00201

100U

50

ZP00202

500U

225

ZP00203

1000U

400
 
相关试剂
抽提试剂盒...
Taq酶...
dNTPs...
荧光定量试剂盒...
枪头、离心管...

Pfu酶用途

主要用于对 PCR 保真性要求较高的实验,如基因筛选、克隆表达、突变检测、定点突变等等。

Pfu酶特征

•  克隆有 Pyrococcus Furiosis DNA Polymerase 基因的大肠杆菌经诱导表达后,再经三次过柱纯化分离出来的一个约 90 KD 的重组蛋白。

•  具有 5' 到 3 ‘合成 DNA 的能力;有 3 '到 5 ‘外切酶的活性即纠错能力,通俗地说,出错的机率是普通 Taq 酶的十分之一。为了减少由 3′-5′ 外切酶活性引起的引物降解,闪晶公司强烈推荐在冰浴上添加所有的试剂并且在温度达到 60 -65°C 时再加入 Pfu DNA 聚合酶以便进行热启动或者在冰浴上添加试剂后放在预热到 95°C 的 PCR 仪上。

•  无 5 ' 到 3 ‘外切酶的活性, 不能用于实时荧光PCR

•  无 3 ‘端加 A 的功能,产物为平端,如果需要做 T - A 克隆,需要做添 A 实验。

•  无外源核酸酶和细菌 DNA 污染。

•  SDS - PAGE 检测,纯度> 95% 。

•  最佳延伸温度 72 ℃ ,最佳 Mg 2+ 浓度 2.0mM ,最佳 dNTPS 浓度 0.2mM ,延伸速度为 600base/min ; Pfu DNA 聚合酶比 Taq DNA 聚合酶的延伸反应速率低,因此闪晶公司推荐延伸反应时间为每 kb 需 2 分钟。

•  10 × PCR buffer: 500mM KCl, 100mM Tris-HCl (pH 9.0 , 25℃ ), 1% TritonX-100 和 20mM MgSO4 。

•  Storage buffer: 20mM Tris-HCl (pH 8.0), 100mM KCl, 0.1mM EDTA, 1mM DTT, 50% 甘 油, 0.5% Nonidet -P40 和 0.5% Tween20 。

Pfu酶单位定义

在 74℃ 条件下, 30 分钟内催化 10nmol dNTP 的掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量为一个单位。反应条件为: 50mM Tris-HCl (pH 9.0 , 25℃ ), 50mM NaCl, 5mM MgCl2, 200mM dNTP( 含未标记和标记 [3H] dTTP ), 10mg 活化的小牛胸腺 DNA 和 0.1mg/ml BSA, 终反应体积为 50ml 。

Pfu酶 (大宗用户价格面议,电话:021-54460831)


金牌酶(热启动酶)

编号

规格

售价¥

ZP00301

100U

300

ZP00302

500U

1250

ZP00303

1000U

2000
 
相关试剂
抽提试剂盒...
反转录试剂盒...
dNTPs...
荧光定量试剂盒...
枪头、离心管...

金牌酶用途

主要用于 PCR 扩增和一步法 RT - PCR ;特别适合临床 PCR 诊断试剂,这样可以降低运输条件和降低对临床操作人员的要求。

金牌酶特征

•  克隆有 Thermu aquaticus DNA Polymerase 基因的大肠杆菌经诱导表达后,经过化学修饰,再经三次过柱纯化分离出来的重组蛋白。

•  在常温下没有聚合酶的活性,需经过 95 ℃ 4mins 的高温造成化学修饰基团的脱落,然后才有聚合的活性;这样就避免在低温阶段的非特异性扩增;大大提高了 PCR 反应的灵敏度和特异性。随着 PCR 扩增的进行,酶活性会被逐步释放,这样就有效提高扩增效率及产物量。

•  具有 5' 到 3 ‘合成 DNA 的能力;无 3 '到 5 ‘外切酶的活性。

•  具有 5 ' 到 3 ‘外切酶的活性, 可用于实时荧光 PCR

•  具有 3 ‘端加 A 的功能,产物经纯化后可直接用于 T - A 克隆。

•  无外源核酸酶和细菌 DNA 污染。

•  SDS - PAGE 检测,纯度> 95% 。

•  最佳延伸温度 72 ℃ ,最佳 Mg 2+ 浓度 1.5mM ,最佳 dNTPS 浓度 0.2mM , 延伸速度为 2000base/min 。

金牌酶单位定义

在 74℃ 条件下, 30 分钟内催化 10nmol dNTP 的掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量为一个单位。反应条件为: 50mM Tris-HCl (pH8.3 , 25℃ ), 50mM NaCl, 5mM MgCl2, 200mM dNTP( 含未标记和标记 [3H] dTTP ), 10mg 活化的小牛胸腺 DNA 和 0.1mg/ml BSA, 终反应体积为 50ml 。

金牌酶(热启动酶) (大宗用户价格面议,电话:021-54460831)


分享到:

欢迎订阅电子期刊
订阅我们的Newsletter,及时阅览最有价值的行业资讯信息和技术资料!
 


Tth DNA 聚合酶

编号

规格

售价¥

ZP00401

100U

400

ZP00402

500U

1600

ZP00403

1000U

3000
 
相关试剂
抽提试剂盒...
反转录试剂盒...
dNTPs...
荧光定量试剂盒...
枪头、离心管...

用途

主要用于 PCR 扩增和一步法 RT - PCR ;它同时具有 DNA 聚合酶的活性和反转酶的活性;可用于实时 PCR 。

特征

•  Tth DNA 聚合酶是一种热稳定性酶,分子量为 92kDa ,从 Thermus thermophilus HB-8 中分离。

•  在 74℃ 时可进行 DNA 复制,在 95℃ 的半衰期为 20 分钟。

•  Tth DNA 聚合酶在镁离子存在的条件下可催化核苷酸沿 5'—3' 方向发生聚合反应,形成双链 DNA ,也可在镁离子存在的条件下,以 RNA 为模板沿 5'—3' 方向发生核苷酸聚合反应。

•  该酶也具有 5' - 3' 外切酶活力,无 3' - 5' 外切酶活力, 可用于实时荧光 PCR

•  能在较高的温度下进行逆转录,增加了引物杂交和延伸的特异性;减少了由于 RNA 二级结构引起的问题。

•  10× 逆转录反应缓冲液: 100mM Tris-HCl (pH 8.3 , 25℃ ), 900mM KCl ; 10×PCR 反应缓冲液: 500mM KCl, 100mM Tris-HCl (pH 9.0 , 25℃ ) 和 1 % Triton X-100 。

•  无外源核酸酶和细菌 DNA 污染。

•  SDS - PAGE 检测,纯度> 95% 。

单位定义

在 70℃ 条件下, 30 分钟内催化 10nmol dNTP 的掺入反应成为 TCA 不溶性物质所需的酶量为一个单位。反应条件为: 50mM Tris-HCl (pH 9.0 , 25℃ ), 50mM NaCl, 10mM MgCl2, 200mM dNTP ( 含未标记和标记 [3H] dTTP ), 活化的小牛胸腺 DNA 作为底物。


UNG酶(尿嘧啶DNA糖基化酶)

编号

规格

售价¥

ZP00501

100U

220

ZP00502

500U

1000

ZP00503

1000U

1800
 
相关试剂
抽提试剂盒...
反转录试剂盒...
dNTPs...
Taq酶...
荧光定量试剂盒...
枪头、离心管...

UNG酶用途

因PCR是一种极敏感的扩增技术,易受污染的影响。小量的外源 DNA 污染可以与目的模板一块被扩增。当前一次扩增产物用来进行新的扩增反应时,会发生共同来源的污染,这称之为残余污染;从其他样品中纯化的 DNA 或克隆的 DNA 也会是污染源。卫生部已经明确规定,凡是用于临床检验的PCR试剂,都应该有 UNG酶技术,以防止污染。

控制污染的方法主要有两种:

1 、在 PCR 实验过程中使用良好的实验步骤和实验环境减少残余污染:使用抗气雾剂移液管的阻止气雾剂进入 eppendorf 管内;为 PCR 样品配制和扩增后分析设计隔离的区域;在准备新反应前更换手套;总是使用不含有模板的阴性对照检测污染;使用预先混合的反应成分,而不是每个反应的每个试剂单独加入。

•  使用尿嘧啶DNA糖基化酶(UDG酶),这种酶(也称为尿嘧啶 -N- 糖基化酶或UNG酶)移除 DNA 中的尿嘧啶,在 PCR 反应液配制时,将dUTP和dTTP 按一定的比例混用,使得扩增产物含有脱氧尿嘧啶,这种产物对 UNG 敏感,所有可以在 PCR 前对新配制的反应用 UNG 处理以破坏残余产物,杜绝污染。

UNG酶特征

•  克隆有 Thermu aquaticus DNA Polymerase 基因的大肠杆菌经诱导表达后,再经三次过柱纯化分离出来的重组蛋白。

•  50ul 体系中,加入 0.1U 的 UNG 酶,能够消除 10 7 带有 dUTP 的、大于 6 个碱基的双链 DNA 污染。

•  反应条件: 37 ℃ , 2 分钟;反应 buffer: 20mM Tris-HCl(PH:8.0); 1mM EDTA; 1mM DTT 。

UNG酶 (大宗用户价格面议,电话:021-54460831)


分享到:


欢迎订阅电子期刊
订阅我们的Newsletter,及时阅览最有价值的行业资讯信息和技术资料!

反转录酶

常见的反转录酶主要有: M-MLV 、 AMV 、 Tth 。通常 MLV 用于普通的 RT 反应, AMV 用于基因比较复杂、有二级结构或 GC 含量较高的 RT 反应, T th 用于单酶体系、基因结构较复杂的 RT 反应;如果 cDNA 要用于克隆表达, 建议使用 MLV 或 AMV ;如果用于基因表达水平的检测或杂交探针的制备,建议使用 Tth 。

RT 反应,引物的选择

随机引物

适用于长的或具有发卡结构的 RNA ;适用于 rRNA 、 mRNA 、 tRNA 等所有 RNA 的反转录反应;主要用于单一模板的 RT-PCR 反应。

Oligo dT

适用于具有 PolyA 尾巴的 RNA 。(原核生物的 RNA 、真核生物的 Oligo dT rRNA 和 tRNA 不具有 PolyA 尾巴。)由于 Oligo dT 要结合到 PolyA 尾巴上,所以对 RNA 样品的质量要求较高,即使有少量降解也 会使全长 cDNA 合成量大大减少。

特异性引物

与模板序列互补的引物,适用于目的序列已知的情况。

影响 RT 反应的因素

影响 RT 反应的因素比较多,主要是 RNA 的质量,要求没有 RNA 酶的污染、没有基因组的污染;另外还有引物的选择是否合适;酶的浓度是否合适等。

 

FicoScript®M-MLV Transcriptase(反转录酶)

编号

规格

售价¥

ZP00601

1000U

150

ZP00602

5000U

500

ZP00603

10000U

800
 
相关试剂
抽提试剂盒...
反转录试剂盒...
dNTPs...
Taq酶...
DEPC...
枪头、离心管...

FicoScript®Reverse Transcriptase(反转录酶) is an engineered version of M-MLV RT with reduced RNase H activity and increased thermal stability. The enzyme is purified to near homogeneity from E. coli containing the modified pol gene of Moloney Murine Leukemia Virus . The enzyme can be used to synthesize first-strand cDNA at temperatures up to 48°C, providing increased specificity, higher yields of cDNA, and more fulllength product than other reverse transcriptases. It can generate cDNA from 100 bp to >12 kb.It is suitable for qPCR. 
1 、 Enzyme Storage Buffer: M-MLV Reverse Transcriptase is supplied in 20mM Tris-HCl (pH 7.5), 200mM NaCl, 0.1mM

EDTA, 1mM DTT, 0.01% Nonidet P-40 and 50% glycerol.

2 、 M-MLV Reverse Transcriptase 5X Reaction Buffer: When the M-MLV Reverse Transcriptase 5X Reaction Buffer supplied with this enzyme is diluted 1:5, it has a composition of 50mM Tris-HCl (pH 8.3 25°C ), 75mM KCl, 3mM MgCl 2 and 10mM DTT.

3 、 Source: Purified from an E. coli strain expressing a recombinant clone.

4 、 Storage Conditions: Store at – 20°C . Avoid exposure to frequent temperature changes.

5 、 Unit Definition: One unit is defined as the amount of enzyme required to catalyze the transfer of 1nmol of deoxynucleotide into acid-precipitable material in 10 minutes at 37°C . The reaction conditions are: 50mM Tris-HCl (pH 8.3), 7mM MgCl 2 ,

40mM KCl, 10mM DTT, 0.1mg/ml BSA, 0.5mM [ 3 H]dTTP, 0.025mM oligo(dT) 50 , 0.25mM poly(A) 400 and 0.01% NP-40.

6 、 Usage Note: M-MLV Reverse Transcriptase is less processive than AMV Reverse Transcriptase, and therefore, more units of the M-MLV enzyme are required to generate the same amount of cDNA as in the AMV reaction. Thus, starting with 1μg of mRNA

in a first-strand cDNA synthesis, 200 units of the M-MLV enzyme are recommended as opposed to 25 units of the AMV enzyme.

反转录酶 (大宗用户价格面议,电话:021-54460831)


AMV Transcriptase(反转录酶)

编号

规格

售价¥

ZP00701

100U

250

ZP00702

500U

1000

ZP00703

1000U

1800
 
相关试剂
抽提试剂盒...
反转录试剂盒...
dNTPs...
Taq酶...
DEPC...
枪头、离心管...

1 、 AMV Reverse Transcriptase 5X Reaction Buffer: The AMV Reverse Transcriptase 5X Reaction Buffer supplied with this enzyme has a composition of 250mM Tris-HCl (pH 8.3 25°C ), 250mM KCl, 50mM MgCl 2 , 2.5mM spermidine and 50mM DTT.

2 、 Enzyme Storage Buffer: AMV Reverse Transcriptase (AMV-RT) is supplied in 200mM potassium phosphate (pH 7.2 4°C ), 0.2% Triton ? X-100, 2mM DTT and 50% glycerol.

3 、 Source: Purified from avian myeloblastosis virus particles.

4 、 Storage Conditions: Store at – 20°C . Avoid multiple freeze-thaw cycles and exposure to frequent temperature changes.

5 、 Unit Definition: One unit is defined as the amount of enzyme required to catalyze the transfer of 1nmol of deoxynucleotide into acid-precipitable material in 10 minutes at 37°C . The reaction conditions are: 50mM Tris-HCl (pH 8.3), 40mM KCl,

8.75mM MgCl 2 , 10mM DTT, 0.1mg/ml acetylated BSA, 1mM radiolabeled dTTP and 0.25mM poly(A):oligo(dT).

6 、 Usage Notes: The AMV Reverse Transcriptase 5X Reaction Buffer is intended for use in standard first-strand cDNA synthesis reactions. No deoxynucleotides are in the buffer; The formulation of AMV Reverse Transcriptase 5X Reaction Buffer is not compatible with M-MLV Reverse Transcriptase. Up to 10μl of an RT reaction containing AMV-RT and the supplied AMV Reverse Transcriptase Reaction Buffer can be added

to PCR amplification reactions that use TaqDNA Polymerase.


Rnasin( 核糖核酸酶抑制剂RNA酶抑制剂)

编号

规格

售价¥

ZP00801

1000U

180

ZP00802

5000U

800

ZP00803

10000U

1500
 
相关试剂
抽提试剂盒...
反转录试剂盒...
dNTPs...
Taq酶...
DEPC...
枪头、离心管...

RNA酶抑制剂概述
RNasin 是从人胎盘中提取的特异性RNA酶抑制剂,分子量为 51,000 道尔顿的蛋白质,等电点 pH 值为 4.7 。它能特异地与 RNase 以 300 的抑制常数 (ki) 以非共价键结合形成复合体而使 RNase 失去活性。在缓冲液为 0 -0.5M NaCl , pH5-8 的条件下保持其活性, pH7.8 时活性最高。经严格质量检验,该产品为电泳纯,无 RNase 、 Nickase 污染,比活为 100,000 单位 / 毫克蛋白,达到国际标准。

RNA酶抑制剂特性
1. 抑制一般的真核 RNase 包括 RNaseA 、 B 、 C 和人胎盘 RNase ;
2. 不抑制 RNase H , S1 核酸酶, SP6 , T7 和 T3 RNA 聚合酶, AMV 或 M-MLV 反转录
酶, Taq DNA 聚合酶, RNase T1 ;
3. 活性 pH 范围宽广,但需要 1mM DTT 以保持其活性。

RNA酶抑制剂应用
1. 用在有潜在 RNase 污染的地方。
2. 在 cDNA 合成中保护 mRNA 。
3. 体外转录系统、翻译系统,保护 mRNA 。
4. 用于多核糖体的活性、产量增加。

5. 增进体外病毒复制。
6. 促进同源体系中的 RNA 翻译。
7. 制备无 RNase 的抗体。
8. 提高 Riboprobe (R) 系统 RNA 合成反应的得率。
浓度 20-40u/ul 。
RNA酶抑制剂单位定义
抑制 5ng RNase A 活性的 50 %所需酶量为一单位。

储藏缓冲液

20mM HEPES-KOH pH7.6, 50mM KCl, 8mM DTT, 50% 甘油。

RNA酶抑制剂对核酸酶的选择性抑制

抑制

不抑制

RNase A

RNase T1

RNase B

S1 核酸酶

RNase C

从曲霉属中提出的 Rnase

 

RNA酶抑制剂的性质    

活性

通过与酶分子非共价结合抑制 RNase 活性

抑制类型

竞争性抑制

结合常数

Ki=4.4×1014

与 RNaseA 结合比例

1:1

分子量

51,000 道尔顿

等电点

pH4.7

自由巯基

30

pH 的适应范围

pH5-8( 在 pH7-8 具有最高活性 )

RNA酶抑制剂 (大宗用户价格面议,电话:021-54460831)


分享到:


欢迎订阅电子期刊
订阅我们的Newsletter,及时阅览最有价值的行业资讯信息和技术资料!

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 
版权所有 ©2004
上海闪晶分子生物科技有限公司(上海闪晶分子生物技术研究所)
地址:上海市闵行区北桥镇吴河路328号A栋2楼 邮编:201109 电话/传真:021-54460831
 
返回顶端