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siRNA/shRNA质粒载体构建技术服务
RNAi (RNAinterference, RNA干扰)技术，即将与内源 mRNA 编码区同源的小片段（19 －23bp）外源双链 RNA（double s`tranded RNA ）导入细胞中，通过一系列细胞内反应引发细胞中相应 mRNA 的降解，从而导致特定基因表达沉默的一种技术。RNAi的作用提供了一种经济、快捷、高效的抑制特异基因表达的技术手段，有助于研究该基因在生物模型系统中的作用，是研究基因功能的重要工具，并且逐步成为病毒性疾病、遗传性疾病以及肿瘤等的基因治疗研究的一种手段。
基本原理示意图
siRNA/shRNA构建技术服务
本公司提供siRNA 载体的构建服务，siRNA 载体可以在细胞内直接转录出shRNA ，其干扰效果等同于siRNA ，而且能够解决 siRNA干扰时间短的缺点。您只需提供需干扰基因的详细信息，包括基因的 mRNA 序列，Genbank Accession No. 和所属物种，本公司负责设计3条针对目的mRNA的siRNA 靶序列，在短时间内构建三个可用于目的mRNA干扰实验的siRNA 载体。可以为您节省大量的时间与精力。此方法是多种siRNA制备方法中唯一可以进行长期基因沉默研究的方法。
闪晶生物siRNA载体构建服务程序：
1. siRNA表达载体的选用：
本公司选用的siRNA 表达载体含新霉素抗性基因和GFP绿色萤光标记，可以建立稳定表达系，同时可以实时监测载体在细胞中的转染效率。载体中还含有Amp抗性基因，可以无限扩增。
2. 设计siRNA靶序列
A 、根据目的mRNA序列，设计3条RNA干扰靶序列，靶序列一般为19 － 21nt 长。
B 、对于每条选定的siRNA 靶序列，设计 siRNA 正义链和反义链，以 loop(9nt) 相连，称为 shRNA（short hairpin RNA）。
C、阴性对照的设立.
3. 合成模板：
合成每条编码 shRNA的DNA 模板的两条单链，退火 DNA 单链得到 shRNA 的 DNA 双链模板。模板链后面接有RNA PolyIII聚合酶转录中止位点，同时两端分别设计 BamHI 和 HindIII 酶切位点，可以克隆到 siRNA 载体多克隆位点的 BamHI 和 HindIII 酶切位点之间。
4. siRNA 空载体用BamHI和HindIII双酶切后，1 ％琼脂糖凝胶电泳，回收线性载体。
5. 连接与转化：
把退火的DNA模板双链连接到线性载体中。采用T4连接酶，插入片断与载体的摩尔比约为 3 ： 1 。连接产物转化DH5α大肠杆菌，在LB Amp培养基上涂板，37 ℃培养过夜。
6. PCR 鉴定
7. 测序鉴定
8.柱抽提阳性克隆载体并定量。 收费标准
siRNA载体构建订单下载
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个数 |
价格(￥) |
时间 |
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1-3个siRNA表达载体构建 |
1800.00/个 |
14个工作日 |
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4－10个siRNA表达载体构建 |
1500.00/个 |
20个工作日 |
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10个以上 |
协商 |
协商 |
闪晶生物同时提供腺病毒和慢病毒载体的构建服务,5000.00元/个.
腺病毒慢病毒构建包装扩增纯化服务
联系电话：021-54460831-11 E-mail:master@shinegene.org.cn shinegene@vip.163.com 乘车路线：火车站坐1号地铁到终点,然后换乘5号线到北桥站即可。
相关的抗生素
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产品编号 |
产 品 名 称 |
中 文 名 称 |
包 装 |
单价(RMB) |
| ZB013 |
Amphotericin B |
两性霉素B |
250mg |
446.00 |
| ZB014 |
Ampicillin,sodium |
氨苄青霉素钠 |
5g |
95.00 |
| ZB026 |
Carbenicillin disodium salt
|
羧苄青霉素二钠 |
1g |
360.00 |
| ZB035 |
Chloramphenicol
|
氯霉素 |
10g |
80.00 |
| ZB058 |
Geneticin
|
G-418 |
1g |
600.00 |
| ZB060 |
Gentamycin Sulfate
|
硫酸庆大酶素 |
1g |
320.00 |
| ZB0756 |
Hygromycin B |
潮霉素B |
250mg |
480.00 |
| ZB081 |
Kanamycin sulfate
|
硫酸卡那霉素 |
5g |
160.00 |
| ZB0907 |
Mitomycin C
|
丝裂霉素C |
2mg |
388.00 |
| ZB0938 |
Neomycin Sulfate |
硫酸新霉素 |
5g |
60.00 |
| ZB106 |
Penicillin G |
青霉素钠盐 |
25g |
160.00 |
| ZB1179 |
Rifoampicin
|
利发霉素（利福平） |
1g |
800.00 |
| ZB1211 |
Spectinomycin dihydrochloride |
壮观霉素 |
1g |
200.00 |
| ZB1214 |
Streptomycin sulfate
|
硫酸链霉素 |
10g |
80.00 |
| ZB1216 |
Streptozocin |
链脲霉素(链脲菌素) |
500mg |
1500.00 |
| ZB1252 |
Tetracycline hydrochloride |
盐酸四环素 |
10g |
135.00 |
| ZB1353 |
Vancomycin HCl |
万古霉素盐酸盐 |
250mg |
450.00 |
即用型抗生素溶液：
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产品名称 |
中文名称 |
溶液浓度 |
包装 |
单价(元) |
|
Amphotericin B |
两性霉素B溶液 |
5mg/ml |
2*10ml |
240.00 |
|
Ampicillin, sodium salt |
氨苄青霉素钠溶液 |
10mg/ml |
2x10ml |
100.00 |
|
G418 Sulfate (Geneticin)
|
G418溶液 |
40mg/ml |
5ml |
360.00 |
|
Gentamycin Sulfate |
硫酸庆大霉素 |
50mg/ml |
2x10ml |
100.00 |
|
Hygromycin B |
潮霉素B溶液 |
50mg/ml |
2x1ml |
240.00 |
|
Kanamycin Sulfate |
硫酸卡那霉素 |
30mg/ml |
2x10ml |
100.00 |
|
Neomycin Sulfate |
硫酸新霉素溶液 |
10mg/ml |
20ml |
150.00 |
|
Nystatin solution |
制霉菌素溶液 |
5mg/ml |
20ml |
240.00 |
|
Penicillin G,sodium salte |
青霉素G溶液 |
10000U/ml |
2×10ml |
120.00 |
|
Streptomycin sulfate |
硫酸链霉素溶液 |
30mg/ml |
2×10ml |
100.00 |
|
Tetracycline HCl |
盐酸四环素溶液 |
50mg/ml |
2×10ml |
100.00 |
|
Penicillin／Streptomycin |
青霉素/链霉素 |
10000U/ml,10mg/ml |
2×10ml |
120.00 |
| Penicillin／Strep／Amp青霉素/链霉素/两性霉素B(10kU,10mg,250ug)/ml 2×10ml 120.00
|
| Penicillin／Strep／Neo青霉素/链霉素/新霉素(5kU,5mg,10mg)/ml2×10ml 120.00 |
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